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        查找:ELISA 結果計算

        閱讀次數:72發布時間:2022/11/15 14:02:28

         

        查找:ELISA 結果計算

        作為 ELISA 的最后一步,檢測結果的計算對整個實驗十分重要。

        以夾心法為例。

        1.  ELISA 的樣本通常要設置 1~2 個復孔進行檢測,分別求出標準品、實驗組樣本的吸光度的平均值。單個樣本的檢測值不應超出平均值的 20%。

        2.  樣本的 OD(吸光度)平均值要減去標準品濃度為 0 時的 OD 平均值。

        3.  建立標準曲線

        在對數坐標圖上擬合四參數的邏輯函數曲線(X 軸上為標準品濃度,Y 軸為對應的 OD 值)。推薦使用 origin 軟件。

        詳細步驟如下:

        第一步: 輸入 OD 值和標準品濃度

         

        第二步:選擇擬合曲線類型

        選中輸入的數值框,按如下操作依次點擊選項。

        第三步:勾選“find specific X/Y”

         

        完成上述操作后,點擊 Fit 按鍵,擬合曲線和相關信息將自動生成(如第四步所示)

         

        第四步:查看標準曲線信息(如參數值,R-Square等)

        第五步:設置坐標軸類型為對數。

        雙擊第四步中的擬合曲線圖,對其進行編輯。雙擊X 軸、Y 軸設置坐標類型為“Log10”。

        第六步:根據標準曲線計算樣本濃度

        選擇第四個工作表(Fit NLF Find X from Y1),在左列輸入樣本的 OD 值,對應的濃度將在右列自動生成。

        如果樣本的
        OD 值超出標準曲線的上限,請在實驗前適當稀釋樣本以獲得精確結果。在分析數據時,樣本實際濃度應為標準曲線上獲得的濃度乘以稀釋倍數。

         

         

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